MÓDULO 3 – AULA 5
Soro

Características gerais do soro
O soro apresenta uma formulação indefinida, mas representa fonte de aminoácidos, proteínas, vitaminas, carboidratos, lipídios, hormônios, fatores de crescimento, sais inorgânicos, minerais, entre outros compostos. Auxilia no tamponamento do pH do meio, reduz a tensão de cisalhamento, ou seja, danos físicos causados pela manipulação e agitação da pipeta que ocorre durante o processo de manipulação da cultura.

Características Gerais do Soro aplicado ao cultivo celular

• Formulação indefinida;
• Fonte de aminoácidos, proteínas, vitaminas, carboidratos, lipídios, hormônios, fatores de crescimento, sais inorgânicos, minerais, entre outros compostos;
• Auxilia no tamponamento do pH do meio;
• Reduzir a tensão de cisalhamento;
• Altera as condições do substrato de cultura, facilitando a adesão e proliferação de células aderentes;

Devido a sua composição, altera as condições do substrato da cultura, facilitando a adesão e proliferação de células aderentes.

O soro necessita de inativação. No que consiste essa inativação?
É inativação de proteínas do sistema complemento presentes no soro responsáveis por respostas imunológicas. Esse processo não interfere nas características que promovem crescimento e/ou desenvolvimento celular.
Se a inativação por calor for necessária, o processo deve ser controlado cuidadosamente para evitar o aumento da formação de precipitados cristalinos e floculantes, gelificação das proteínas séricas e perda excessiva do desempenho de crescimento. Danos significativos ao soro podem ocorrer quando ele é submetido a temperaturas mais altas do que o necessário ou aquecido por longos períodos. O procedimento de inativação consiste basicamente em aquecimento em banho-maria por 30 minutos a 56ºC. É muito importante fazer a verificação do tipo de soro, tipo celular e protocolo a ser executado para definir se existe realmente a necessidade dessa inativação.

Tipos de soro
Os tipos de soro mais utilizados são: Soro fetal bovino, que é o mais amplamente utilizado, soro de bezerro e soro de cavalo.

Soro fetal bovino
É rico em fatores de crescimento e apresenta baixos níveis de alfa globulinas, adequado para células que não apresentam alta taxa de proliferação.

Soro de bezerro
Este soro apresenta níveis de fatores de crescimento menos elevados. Adequado para estudos de diferenciação celular em que fatores de crescimento podem interferir nos resultados. Adequado para níveis de proteínas mais elevados, rico em lipídios. Esse soro deve ser selecionado ao invés do soro fetal bovino, quando as células necessitam de altos níveis de lipídios quando cultivadas.

Soro de cavalo
Esse soro é colhido de animais adultos por meio de um sistema fechado de coleta, com isso, apresenta maior homogeneidade entre os lotes. Possui baixa concentração de componentes específicos, como poliaminas, dessa maneira, apresenta baixa atividade proliferativa.

Alternativas ao uso de soro
O soro apresenta uma composição química indefinida, não existe controle fino da composição do soro fetal bovino. Variações continentais, sazonais e de lote para lote são comuns. Além disso, a possibilidade de contaminação viral em produtos de derivação animal, mesmo em insumos comercializados, pode ser bastante alta. Dessa maneira, existe uma busca por novas alternativas de suplementação, como por exemplo, extratos de soro, extratos de tecido hidrolisados, fatores de crescimento, hormônios, proteínas carreadoras, lipídios, metais, vitaminas, poliaminas e agentes redutores.
O número de combinações desses suplementos é quase infinito. Eles costumam interagir um com o outro, então a seleção da melhor combinação desses insumos necessita de um enorme esforço, tempo e custo.

Alternativas ao uso de soros de origem animal na suplementação de meios de cultivo

Categoria	Características	Limitações
Extratos de tecido e soro	Produção controlada; rico em componentes;	composição indefinida; variabilidade; origem animal
Fatores de crescimento	Induzem proliferação, diferenciação, migração etc.	alto custo;
Hormônios	Manutenção e proliferação celular;	instabilidade; necessidade de cofatores;
Proteínas carreadoras	carreadores de componentes essenciais;	Capacidade de ligação a toxinas;
Lipídeos	composição da Membrana Plasmática; armazenamento e transporte de nutrientes; transdução de sinal;	Necessidade da adição de reagentes para solubilização;
Vitaminas	precursores de cofatores necessários na divisão e crescimento celular;	altamente instáveis;
Poliaminas	síntese de proteínas e ácidos nucléicos;	altas concentrações causam apoptose;
Agentes redutores	importação de cisteína;	toxicidade;

Adaptado de Yao, T; Asayama, Y. Animal-cell culture media: History, characteristics, and current issues. Reprod Med Biol. 2017;16:99–117.DOI:10.1002/rmb2.12024. Disponívelem:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5661806/
Acessoem22/04/21

Meio serum free

São meios 100% definidos, livres de soro, os chamados meios serum free. Normalmente são desenvolvidos de forma específica par cada linhagem celular. A substituição do soro em cultura é um processo complexo e oneroso, mas atualmente existe uma tendência para a redução do uso de componentes animais na pesquisa e desenvolvimento de produtos e o processo de substituição de soro é muito importante quando se consideram as vantagens de não se utilizar o soro de origem animal em culturas.

 

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